水稻转录因子RST1互作蛋白的鉴定及其耐盐功能分析

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水稻转录因子RST1互作蛋白的鉴定及其耐盐功能分析
论文目录
 
摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
符号及缩略语表第12-14页
绪论第14-16页
第一章 文献综述第16-26页
1 植物的盐胁迫研究进展第16-22页
  1.1 土壤盐渍化概述第16-17页
  1.2 植物适应盐胁迫的机制第17-22页
    1.2.1 植物对盐胁迫信号的感知第18-20页
    1.2.2 植物体内Na~+的转运和解毒通路第20-22页
2 转录因子与植物耐盐性第22-23页
3 转录因子的修饰第23-24页
4 研究目的及意义第24-26页
第二章 RST1互作蛋白的筛选及验证第26-46页
引言第26-27页
1 材料与方法第27-38页
  1.1 实验材料第27页
  1.2 pGBKT7-RST1载体的构建第27-31页
    1.2.1 OsRST1的CDS序列克隆第27-29页
    1.2.2 基因和载体的酶切:第29页
    1.2.3 质粒的连接第29页
    1.2.4 质粒的转化第29页
    1.2.5 菌落PCR鉴定阳性克隆第29-30页
    1.2.6 质粒的提取第30页
    1.2.7 双酶切鉴定及测序第30-31页
  1.3 酵母双杂交筛库第31-32页
    1.3.1 制备酵母感受态第31页
    1.3.2 转化第31-32页
    1.3.3 毒性与自激活检测第32页
    1.3.4 酵母融合第32页
  1.4 互作验证第32-35页
    1.4.1 酵母双杂载体构建第32-33页
    1.4.2 Pull-down载体构建第33页
    1.4.3 BiFC载体构建第33-34页
    1.4.4 基因与载体的酶切与连接第34页
    1.4.5 质粒的转化第34-35页
  1.5 酵母双杂交回转验证第35-36页
    1.5.1 酵母感受态制备第35页
    1.5.2 质粒共转化第35页
    1.5.3 涂板第35页
    1.5.4 酵母点斑第35-36页
  1.6 Pull-down第36-37页
    1.6.1 转化第36页
    1.6.2 原核表达蛋白第36-37页
    1.6.3 Pull-down第37页
  1.7 双分子荧光互补BiFC第37-38页
    1.7.1 农杆菌的转化第37页
    1.7.2 农杆菌侵染烟草第37-38页
2 结果分析第38-43页
  2.1 酵母双杂交筛库第38-40页
    2.1.1 酵母菌落PCR第38页
    2.1.2 酵母质粒提取送样测序第38-40页
  2.2 回转验证(酵母双杂交)第40-42页
    2.2.1 CDS全长回转验证第40页
    2.2.2 结构域截段回转验证第40-42页
  2.3 Pull-down第42页
  2.4 双分子荧光互补BiFC第42-43页
3 讨论第43-46页
第三章 RST1互作蛋白CBSX3的定位及其耐盐功能分析第46-64页
引言第46-47页
1 材料与方法第47-56页
  1.1 实验材料第47页
  1.2 OsCBSX3的表达模式分析第47-51页
    1.2.1 组织定量第47-49页
    1.2.2 GUS组织定位第49-51页
  1.3 亚细胞定位第51-53页
    1.3.1 烟草亚细胞定位第51-52页
    1.3.2 洋葱表皮亚细胞定位第52-53页
  1.4 水稻转基因材料构建第53-54页
    1.4.1 水稻OE-CBSX3过表达株系构建第53-54页
    1.4.2 水稻RNAi-CBSX3干扰株系构建第54页
  1.5 野生型水稻的胁迫处理第54-55页
    1.5.1 盐胁迫第54页
    1.5.2 干旱胁迫第54-55页
  1.6 OE-CBSX3过表达株系的盐处理第55-56页
    1.6.1 盐处理第55页
    1.6.2 过表达株系的定量分析第55页
    1.6.3 Na~+、K~+测定第55-56页
2 结果分析第56-63页
  2.1 组织定位第56页
    2.1.1 OsCBSX3的组织表达模式第56页
  2.2 亚细胞定位第56-58页
    2.2.1 烟草亚细胞定位第56-57页
    2.2.2 洋葱表皮亚细胞定位第57-58页
  2.3 OsCBSX3对胁迫的响应第58-59页
    2.3.1 OsCBSX3对盐胁迫的响应第58页
    2.3.2 OsCBSX3对干旱胁迫的响应第58-59页
  2.4 OE-CBSX3过表达株系的盐处理第59-63页
    2.4.1 盐处理表型分析第59页
    2.4.2 存活率第59-61页
    2.4.3 盐处理前后Na~+、K~+含量第61-62页
    2.4.4 过表达株系中OsCBSX3和OsRST1的表达量分析第62-63页
3 讨论第63-64页
第四章 RST1互作蛋白Hsp40的定位及其耐盐功能分析第64-74页
引言第64-65页
1 材料与方法第65-67页
  1.1 实验材料第65-66页
  1.2 亚细胞定位第66-67页
    1.2.1 载体构建第66-67页
  1.3 OE-Hsp40过表达株系的盐处理第67页
    1.3.1 荧光定量引物设计第67页
    1.3.2 过表达载体构建第67页
2 结果分析第67-73页
  2.1 亚细胞定位第67-69页
    2.1.1 烟草亚细胞定位第67-68页
    2.1.2 洋葱表皮亚细胞定位第68-69页
  2.2 OsHsp40对胁迫的响应第69-70页
    2.2.1 对盐胁迫的响应第69-70页
    2.2.2 对干旱胁迫的响应第70页
  2.3 OE-Hsp40过表达株系的盐处理第70-73页
    2.3.1 盐处理表型第70-72页
    2.3.2 存活率第72页
    2.3.3 过表达株系中OsHsp40和OsRST1的表达量分析第72-73页
3 讨论第73-74页
全文结论和创新之处第74-76页
参考文献第76-86页
附录Ⅰ第86-87页
附录Ⅱ第87-88页
致谢第88-90页
学术成果目录第90页

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